發(fā)布日期:2020-07-02 發(fā)布人:潤達(dá)生物
輔助噬菌體是一種自身DNA復(fù)制效率極低的絲狀噬菌體突變型。
輔助噬菌體是一種自身DNA復(fù)制效率極低的絲狀噬菌體突變型。其基因組具有M13噬菌體的所有功能基因,但I(xiàn)G區(qū)是缺陷的,不能被pⅡ蛋白識(shí)別,因而輔助噬菌體本身DNA不能進(jìn)行單鏈復(fù)制。
輔助噬菌體能為噬菌粒提供pⅡ蛋白和包裝蛋白,在輔助噬菌體的幫助下,噬菌粒可以順利的進(jìn)行DNA的復(fù)制與噬菌體的包裝,完成對(duì)宿主的侵染(這一過程通常稱為超染)。
常用的輔助噬菌體有VCSM13和M13K07等。
輔助噬菌體的工作原理:
當(dāng)含有重組基因的噬菌粒轉(zhuǎn)染至大腸桿菌后,再用輔助噬菌體進(jìn)行超染,輔助噬菌體合成的pⅡ蛋白就會(huì)優(yōu)先識(shí)別噬菌粒上的正?;蜷g隔區(qū)(IG region),啟動(dòng)滾環(huán)復(fù)制,產(chǎn)生ssDNA,這樣所產(chǎn)生的子代噬菌體外殼蛋白所包裝的ssDNA主要是來自含有重組基因組的噬菌粒的DNA,并同時(shí)展示噬菌粒編碼的pⅢ或pⅧ與外源肽段的融合蛋白和輔助噬菌體編碼的野生型pⅢ或pⅧ蛋白,確保重組噬菌體能正常感染組裝和增值。